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無信號1、一抗和二抗不匹配:二抗需和一抗宿主的物種相同(一抗來自鼠,二抗便是抗鼠抗體)。2、沒有足夠的一抗或二抗結合目標蛋白:使用高濃度抗體。4℃延長孵育時間。(如過夜)3、封閉劑與一抗或二抗有交叉反應:使用溫和的去污劑,如吐溫-20,或換封閉劑(常用脫脂奶粉、BSA、、明膠)。4、一抗不識別待檢物種的蛋白:參照說明書,對比原序列和蛋白序列以確保抗體和目的蛋白會發(fā)生反應。設置陽性對照。5、蛋白上樣
百螢 鏈霉親和素偶聯(lián)物 mFluor Yellow630-標記
1.百螢 ?鏈霉親和素偶聯(lián)物 mFluor Yellow630-標記參數Ex(nm)? ? ?570Em(nm)? ? ?632分子量? ??~52000溶?劑? ? ?Water存儲條件? ?在-15℃以下保存,避光防潮?2.百
熒光共振能量轉移 (FRET) 是兩個發(fā)色團(供體分子和受體分子)之間依賴于距離的能量轉移。當靠近時,電子激發(fā)的供體生色團可以通過分子內長程偶-偶耦合相互作用以非輻射方式將能量轉移到受體生色團。因此,能量的轉移淬滅了供體的熒光強度并減少了其激發(fā)態(tài)壽命,同時增加了受體生色團的排放系數。由于 FRET 的效率取決于分子間分離的反六次方,因此它是一種有利的技術,可用于研究產生分子接近度變化的各種生物現象
1.百螢 ?A** 488 NHS酯概述?A** 488 NHS酯是美國AAT Bioquest生產的熒光染料。A** 488是一種基于羅丹明的熒光標記。與其他A**染料不同,它具有優(yōu)異的水溶性。它具有良好的光譜特性,可用于熒光成像應用,包括強吸收,高熒光產率和高光穩(wěn)定性。A** 488非常適用于單分子檢測應用和高分辨率顯微鏡,如PALM,dSTORM,STED等。該
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